在高效液相色谱检测中,对照品纯度直接影响定量分析的正确性,在售后工作中时时遇见因对照品纯度异常导致数据误差的案例。现从专业角度分解原因及应对战术:
1: 检测波长选择差距
原因:杂质峰与对照品峰有分歧的紫表吸收特点,在分歧波长下出现分歧的色谱图。
解决规划:选择对照品与杂质拥有类似吸收特点的波长,纯度了局会更趋近真实值(如示图选择255nm检测)。

2:空缺滋扰
原因:部门溶剂在特定波长下有紫表吸收,出格是结尾波长下;蛉芗帘淮疽不岢鱿忠恍┰臃,导致对照品检测纯度不够。
解决规划:检测对照品时用一样色谱步骤检测空缺溶剂,扣除空缺溶剂中的峰即可排除空缺滋扰。

3:对照品溶液不不变
原因:部门对照品固体状态时不变,但是溶化后却容易降解(如在溶液中存在互变异构或产生水解等化学反映)。
解决规划:找到不不变的原因,并隔绝不不造成分(如现配现测,或更换合适的溶剂。)

4: 溶化性影响
原因:部门对照品在当前溶剂下溶化性较差,在溶化时对照品或其杂质溶化不充分,从而导致纯度异常。
解决规划:更换溶化性更好的溶剂、降低配造浓度或增长助溶剂(DMSO或DMF)。
5:样品传染
原因:对照品可能在保留期间、运输期间、取样期间、甚至上机检测期间被不干净的用具、器皿、溶剂等传染,导致纯度不够。
解决规划:尽量预防各个环节传染,如使用干净的器皿、新开封的溶剂,且检测前确保色谱柱、仪器系统已经齐全被冲刷干净(可先进空缺溶剂以确证)。
6: 色谱柱问题
原因:色谱柱柱效降落或色谱柱不合用
解决规划:测试柱效,查看柱效参数是否切合要求。如为柱效降落则更换新的色谱柱;如为色谱柱不合用,可选择具更高选择性的色谱柱,如HILIC、手性柱等。
7: 溶剂效应
原因:对照品溶剂强度大于流动相强度,可造成的色谱峰变形、分叉或出现异常峰。
解决规划:使用与流动相初始比例极性相当的溶剂溶化对照品、或降低进样量。

8: 样品过载
原因:对照品浓度配造过高,超过色谱柱的载样量,也可能使检测器响应过载,导致纯度了局异常。
解决规划:降低对照品浓度。
9: 对照品产生降解
原因:对照品存储前提不当,如光照、温度、湿度或密封性等不合适会导致降解。
解决规划:使用惰性气体;,密封包装,避光保留于-20℃或2-8℃环境(视化合物性质而定)。对使用者而言,收到对照品的第一功夫按产品说明书保留对照品。
10:基线噪音过大
原因:当基线噪音过大时,易将溶剂峰、系统峰谬误积分计入杂质。
解决规划:排除仪器系统滋扰和流动相的影响,如查抄检测器氘灯能量、流通池传染或气泡、泵传染或泵不变性、温度不变性、流动相气泡或均匀性等。
11: 洗脱法式不合用
原因:某些极性极度相近的杂质在色谱前提下未分离,如异构体杂质。
解决规划:优化洗脱法式(如改为梯度洗脱、耽搁洗脱功夫、调整有机相比例等)。
12: 检测器不合用
原因:化合物因其分歧的结构特点,拥有分歧紫表特点吸收,也合适分歧的检测器(或检测波长),因而可能出现不出峰、峰面积偏低、纯度偏低等情况。
解决规划:选择合适的检测器,如没有紫表吸收的化合物能够选择蒸发光检测器或者示差折光检测器,或选择合适的检测波长(参考第一条)。